欢迎访问郑州三叶医疗器械有限公司!

全国服务热线:

0371-67715372
原发性膜性肾病血清学诊断常见问答
新闻动态
联系我们

联系人:黄经理

电话:0371-67715372

邮箱:zzsy371@163.com

地址:郑州市嵩山北路222号天龙大厦1501A

原发性膜性肾病血清学诊断常见问答

原发性膜性肾病血清学诊断常见问答

原发性膜性肾病血清学诊断常见问答

1、血清抗 PLA2R 抗体检测可以替代肾穿刺活检吗

肾活检对明确病理变化及病理分型、选择治疗方案及判断预后具有重要意义。2012 KDIGO 指南中明确写明,肾脏活检对于肾小球类疾病诊断是必需的。但肾脏活检作为有创性诊断手段,需要做好充分的术前准备,有明显出血倾向、凝血障碍、穿刺部位皮肤感染、肾结核、肾脓肿等疾病属于肾活检的禁忌症,而且肾活检后也可能导致镜下或肉眼血尿等并发症。

血清抗 PLA2R 抗体检测可帮助鉴别原发性和继发性膜性肾病;监测原发性膜性肾病患者血清抗 PLA2R 抗体的变化将有助于动态掌握患者肾脏免疫炎症活动情况,评估治疗效果,决定治疗时间窗;预测原发性膜性肾病患者蛋白尿及肾功能的转归;还可准确预测肾移植术后膜性肾病的复发风险。因此作为相对无创的检测手段,抗体检测 与肾活检同时进行,特别是在不适宜进行肾脏活检的病人中,抗体检测可为临床诊疗提供非常重要的依据。

文献:

Kidney biopsy is mandatory for diagnosis.- KDIGO Clinical Practice Guideline for Glomerulonephritis. 2012

2为何血清无法检测 PLA2R 抗原,组织 PLA2R 抗原检测与血清抗 PLA2R 抗体检测的区别

M 型磷脂酶 A2 受体(PLA2R)是一种 I 型跨膜蛋白,由胞外结构域及胞内结构域组成,胞外部分由 N 末端半 胱氨酸富含区域、II 型纤维蛋白区域和串联重复糖识别区域构成;胞内为 C 末端区域,属于 C 型外源性凝集素超家族 - 甘露糖受体家族,在多种人组织中均有表达,亦表达于肾小球足细胞。生理情况下外周循环系统中不存在 PLA2R 抗原。2009 Beck 等人对于抗 PLA2R 抗体的首次报道中已发现,在 IMN 患者血清中,未能发现游离的 PLA2R 抗原或 PLA2R-IgG 免疫复合物。结果表明,在膜性肾病患者中检出的 PLA2R-IgG 免疫复合物中的 PLA2R 并非循环抗原。因此在血清中无法检测 PLA2R 抗原。

另外,有研究证明,相比组织学 PLA2R 抗原检测,血清中抗 PLA2R 抗体滴度与病程活动、治疗情况密切相关,并随疾病进展发生相应变化,因此更适合于病情进展的跟踪及疗效监测 , 且简便、无创的血清抗体检测更易于临床实施。

文献:

1.Laurence H.Beck, et al. M-Type Phospholipase A2 Receptor as Target Antigen in Idiopathic Membranous Nephropathy. N Engl J Med 2009;361:11-21.

2.Debiec H, Ronco P. PLA2R autoantibodies and PLA2R glomerular deposits in membranous nephropathy. N Engl J Med 2011;364:689-90

3、抗 PLA2R 抗体滴度与病情变化的相关?

已有大量文献证实,监测原发性膜性肾病患者血清抗 PLA2R 抗体的变化将有助于动态掌握患者病情变化。

Hofstra 等人的研究表明,患者抗 PLA2R 抗体的滴度与患者 24 小时蛋白尿的含量具有正相关性,24 小时蛋白尿是原发性膜性肾病随诊的重要指标,因此抗 PLA2R 抗体滴度可作为评价疾病活动的重要指标;另外,抗PLA2R 抗体滴度在疾病的不同分期(发病期、缓解期、复发期)有明显变化,因此抗体滴度可用于反应疾病活动度。

 

Beck 等人的研究表明,伴随着利妥昔单抗治疗,抗 PLA2R 抗体滴度变化与治疗反应性的响应速度优于传统的蛋白尿指标。

 

4、抗 PLA2R 抗体监测的频率及时间间隔

目前对于抗体监测频率尚无统一标准,但已有多项研究对抗 PLA2R 抗体监测频率提出了建议,来自马里奥·内格里药理学研究所(IRCCS)的 Ruggenenti 等人建议对于接受免疫抑制剂治疗的病人,在治疗后的第 12369 12 月应进行抗 PLA2R 抗体水平的监测,且建议至少每 6 个月应进行一次抗体水平的监测。

2013 Hofstra 等人发表于 nature reviews nephrology 杂志上的综述文章明确建议:对于启动免疫抑制剂治 疗的膜性肾病患者应每月监测抗体水平,如抗体消失可停止治疗,并持续监测预后。如后续复发蛋白尿,需要再 次检测抗 PLA2R 抗体,判断患者是否为活动期或其他原因如继发性局灶性肾小球硬化导致。

文献 :

1.Piero Ruggenenti, et al. Anti-Phospholipase A2 Receptor Antibody Titer Predicts Post-Rituximab Outcome of Membranous Nephropathy. J Am Soc Nephrol 26, 2015

2.Hofstra JM, et al. Treatment of idiopathic membranous nephropathy. Nat Rev Nephrol 9, 443-458(2013)

5、抗 PLA2R 抗体的低、高滴度如何界定

目前关于抗 PLA2R 抗体的滴度尚无统一标准,但根据 Hofstra 等人文献报道,使用欧蒙的 IIFT(间接免疫荧光)方法学产品,可将抗体滴度划分为:1:10 1:32 为低滴度;1:100 为中滴度;>1;100 为高滴度。该研究同样表明,临床常见样本中的抗体滴度分布较为广泛,滴度从 1:10 1:3200 均有出现。

 

该文章同样采用 ELISA 方法学定量检测抗体水平(内部自制 ELISA 试剂),文献报道原发性膜性肾病患者的自发缓解率随抗 PLA2R 抗体水平的增高而显著降低。

 

文献:Hofstra JM, et al. Antiphospholipase A2 Receptor Antibody Titer and Subclass in Idiopathic Membranous Nephropathy. J Am Soc Nephrol 23: 17351743, 2012.

6、为什么并非所有原发性膜性肾病均可检出抗 PLA2R 抗体

多篇文章表明,抗 PLA2R 抗体在不同人群中的阳性率略有差异,无论是通过组织活检检测 PLA2R 还是通过血清学检测抗 PLA2R 抗体,均无法达到 100% 的检出率。血清抗 PLA2R 抗体的总体检出率约为 70%

抗体滴度会随着疾病活动性而发生波动,甚至可能由于以下原因导致检测结果为阴性:

自发缓解、免疫抑制治疗、一些患者可能被误诊为原发性膜性肾病(其实是继发性)、表达抗 PLA2R 抗体以外的自身抗体(例如抗 THSD7A 抗体)。

PLA2R 是目前发现的原发性膜性肾病的重要靶抗原,但不是唯一抗原,目前已发现新的原发性膜性肾病潜在靶抗原,如 Beck 等人于 2014 年发现的潜在靶抗原THSD7A

7、检测血清抗 PLA2R 抗体方法学有哪些,有何区别

欧蒙公司的抗 PLA2R 抗体检测试剂盒采用独家重组抗原专利技术,是全球唯一的商品化血清学诊断试剂盒。 根据不同诊疗需求,为临床提供两种方法学试剂:间接免疫荧光法(IIFT)和酶联免疫法 (ELISA)

IIFT 方法使用转染细胞(重组人 PLA2R 蛋白)和非转染细胞(作为对照)作为检测基质,实现高灵敏度及特异性的检测性能,由于转染细胞呈现了抗原的天然构象,因此灵敏度略高于 ELISA 试剂。ELISA 方法的微孔内包被重组人 PLA2R 蛋白,可定量检测血清或血浆中的抗 PLA2R 抗体,通过 Cut-off 值的优化设定,具有极高特异性(文献报道特异性可高达 99.9%)。

建议使用 IIFT 方法对首诊病人进行初筛,确保阳性检测出率,抗体阳性患者后续使用 ELISA 方法进行定量监测,动态了解病情变化及治疗效果。

文献:Cornelia Dähnrich et al. Development of a standardized ELISA for the determination of autoantibodies against human M-type phospholipase A2 receptor in primary membranous nephropathy. Clinica Chimica Acta 421 (2013) 213218